Toll 樣受體 9 (TLR9) 可識別微生物而非脊椎動物基因組 DNA 中普遍存在的特定未甲基化 CpG 基序,從而引起先天性和獲得性免疫反應。CpG ODN 是含非甲基化CpG基序的寡聚脫氧核苷酸( Oligodeoxynucleotides containing CpG motifs) ,合成的CpG ODN具有和細菌DNA類似的免疫刺激作用。CpG ODN廣泛應用于細胞的刺激和活化、動物體內注射、佐劑等方面,但是你真的了解CpG ODN嗎?不同的種類的CpG ODN的免疫刺激性不同,你使用的CpG ODN選對了嗎?
CpG ODN的區分
與基因組細菌DNA中發現的天然磷酸二酯(PO)骨架相反,CpG ODN具有部分或完全硫代磷酸化(PS)骨架。基于其結構特征和對人外周血單核細胞( PBMC ) ,特別是B細胞和pDC細胞的刺激活性,將其分為A、B、C三類。
A類ODN 的特點是含有PO中心CpG 的回文基序和 PS 修飾的 3’端poly-G。能夠誘導pDC細胞產生大量IFN-α,但它們是TLR9 依賴性NF-κB信號傳導和促炎細胞因子產生的弱刺激劑。
B類ODN 包含帶有一個或多個CpG二核苷酸的完整PS主鏈能夠,強烈激活 B 細胞和TLR9 依賴性NF-κB信號傳導,刺激IFN-α分泌的效果微弱。
C類ODN 結合了A類和B類的結構特征,包含一個完整的PS主干和一個包含 CpG的回文基序。在功能上,具有誘導pDC產生IFN-α以及B細胞刺激的活性,但是其效果分別弱于單獨使用A類或B類ODN 。
· 圖1 · CpG ODN結構圖解
· 圖2 · CpG ODN功能圖解
ODN不僅有刺激活性上的區分,還有種屬之分,你敢信嗎?工欲善其事,必先利其器。選對了ODN,做實驗也能“事半功倍”。
A類ODN
名稱 |
種屬特異性 |
描述 |
ODN 1585 |
小鼠 |
文獻引用最多小鼠A類ODN |
ODN 2216 |
人 |
文獻引用最多人A類ODN |
ODN 2336 |
人 |
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應用:
1. 抑制HUVEC細胞IL-8分泌,ODN 2336
2. 誘導pDC細胞產生IFN-α、TNF-α,ODN 2216
3. 誘導PBMC細胞產生IFN-α、IFN-γ,ODN 2216
4. 誘導Mincle介導的小鼠巨噬細胞活化,ODN 1585
5. RAW 264.7細胞NLRP3激活Priming,ODN 1585
B類ODN
名稱 |
種屬特異性 |
描述 |
ODN 1668 |
小鼠 |
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ODN 1826 |
小鼠 |
文獻引用最多小鼠B類ODN |
ODN 2006 |
人 |
文獻引用最多人B類ODN |
ODN 2007 |
牛/豬 |
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ODN BW006 |
人/鼠 |
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ODND-SL01 |
人/大鼠/小鼠/兔/豬/狗 |
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應用:
1. 注射小鼠體內可以激活kupffer細胞,ODN 1668
2. 誘導小鼠骨髓來源的巨噬細胞 , ODN 1826
3. 瘤內注射上調腫瘤內T細胞OX40表達, ODN 1826
4. 誘導小鼠DC細胞成熟, ODN 1826
5. 增強腫瘤內T細胞浸潤(提高T細胞數量、增強T細胞活化), ODN 1826
6. 誘導BMDM細胞分泌TNF-α, ODN 1826
7. 誘導人CLL細胞分泌IL-10,ODN 2006
8. 刺激PBMC細胞表達CD19、pSTAT3,ODN 2006
9. 誘導PBMC細胞產生IL-10,ODN 2006
10. 刺激兔B細胞分泌免疫球蛋白,ODN D-SL01
C類ODN
名稱 |
種屬特異性 |
描述 |
ODN 2395 |
人/小鼠 |
文獻引用最多C類ODN |
ODN M362 |
人/小鼠 |
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ODN D-SL03 |
人/大鼠/小鼠/兔/豬/狗 |
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應用:
1. 作為納米佐劑注射C57BL6小鼠,ODN 2395
2. 誘導原代人CLL細胞極化和遷移,ODN 2395/ODN 2006
ODN 2088 —TLR 9拮抗劑
通過破壞CpGODNs與TLR9在內涵體囊泡中的共區域化而發揮作用,而不影響細胞結合和攝取。
應用:
1. TLR9抑制劑治療大鼠疾病模型,ODN 2088
CpG ODN的選擇你明白了嗎?
InvivoGen 1977年成立于法國,是法國第一家生物科技公司。公司成立的初期階段主要提供細胞培養相關試劑,如抗支原體、細菌、真菌污染的抗生素以及基因篩選抗生素(Blasticidin, Puromycin, HygromycinB,G418, Zeocin)。隨著天然免疫研究熱點的興起,InvivoGen于2000年開始致力于天然免疫相關產品的研發和生產,并成為全世界最優質、最專業的天然免疫相關產品生產商。InvivoGen為天然免疫研究提供一整套研究方案,包括不斷更新的模式識別受體(PRRs)激動劑和拮抗劑,PRRs報告基因細胞以及天然免疫信號通路的誘導劑和抑制劑等。