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“小體積”卻有“大容量”,我們是不一樣的磁珠純化!

作者:admin 信息來源:達科為 日期:20190614 打印 字體:  
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Strep-tag?蛋白純化系統是基于生物素(Biotin)和鏈霉親和素(Streptavidin)之間的相互作用開發出來的親和層析蛋白純化體系。

IBA Lifescience經過不斷的優化,目前已經研發出兩套成熟的Strep-tag?蛋白純化體系:

  • 二代Strep-tag? II & Strep-Tactin?

  • 具有更高親和力的三代Twin-Strep-tag&Strep-Tactin?XT

*想了解詳細系統介紹,請點擊查看:

IBA蛋白純化技術革新:第三代Strep-tag?系統

MagStrep “type3” XT beads

IBAStrep-tag?蛋白純化產品,除了預裝柱、?KTA?儀器預裝柱、填料等,還有專門針對小規模、高通量純化Strep-tag?融合蛋白的磁珠產品。

MagStrep “type3” XTbeads是由Strep-Tactin?XT涂布的磁珠,不僅可以純化含Strep-tag?的蛋白,還可以用于Pull-downRNA Co-IP實驗(文末附有參考文獻)。

技術優勢

  •  高結合載量:~0.85 nmol/μl beads,相當于可結合25.5 μg 30kDa的蛋白;

  •  低背景非特異性的結合少;

  • 靈活的洗脫方式loading buffer存在的條件下煮沸洗脫,或者使用Biotin將目標蛋白從磁珠上洗脫;

  • Strep-tagIITwin-Strep-tag?的親和力極高歸功于磁珠上的Strep-Tactin?XT。

實驗參數

圖1. 使用MagStrep “type3” XT beads從原始細菌提取物中純化GFP-Strep-tag融合蛋白。

使用Agilent Bioanalyzer 2100 System分析提取出來的蛋白,發現不管是直接以Buffer BXT (含Biotin)將靶蛋白洗脫下來,或是加入sample buffer煮沸來分離目標蛋白,都能得到高純度的蛋白。

適用范圍

  • 樣本體積不超過2.5 ml;

  • 建議目的蛋白濃度>10 μg/ml;

  • 磁珠大小為25 μm,可做批量處理;

  • 不能重復使用。

綜合以上特點,使用MagStrep “type3” XTbeads可得到極佳的純化效果。對于需要高純度蛋白的您,此磁珠是最適用于小規模、快速蛋白質純化的工具。

相關產品

產品

規格

貨號

磁珠

MagStrep  "type3" XT beads 5% suspension

2 ml

2-4090-002

相容磁座

Magnetic  Separator

for 24 reaction  tubes

2-1602-000

洗脫溶液

10x Buffer BXT;  Strep-Tactin?XT Elution Buffer

25 ml

2-1042-025

洗滌溶液

10x Buffer W;  Strep-Tactin?/Strep-Tactin?XT Wash Buffer

100 ml

2-1003-100

參考文獻

  • Protein purification

Essuman K, Summers DW, Sasaki Y, Mao X, Yim AKY, DiAntonio A, MilbrandtJ. (2018) TIR Domain Proteins Are an AncientFamily of NAD+ -Consuming Enzymes. Curr Biol. 28(3): 421-430.

Zhang Y, Ptacin JL, Fischer EC, Aerni HR, CaffaroCE, San Jose K, Feldman AW, Turner CR, Romesberg FE. (2017)A semi-synthetic organism that stores and retrieves increased genetic information. Nature. 551(7682): 644-647. 

  • Pull-down assay

González M, Brito N, González C. (2017)The Botrytis cinerea elicitor protein BcIEB1 interacts with the tobaccoPR5-family protein osmotin and protects the fungus against its antifungalactivity. New Phytol. 215(1): 397-410. 

Jeong, S. J., Park, S., Nguyen, L. T., Hwang, J., Lee, E. Y., Giong, H.K., ... & Kim, H. K. (2019).A threonyl-tRNA synthetase-mediated translation initiation machinery. NatureCommunications10(1), 1357.

Maidorn, M., Olichon, A., Rizzoli, S. O., & Opazo, F. (2019). Nanobodies reveal an extra-synaptic population of SNAP-25and Syntaxin 1A in hippocampal neurons. In MAbs (Vol. 11,No. 2, pp. 305-321). Taylor & Francis. 

  • RNA co-immunoprecipitation 

Chen Z, Mashburn-Warren L, Merritt J, Federle MJ, Kreth J. (2017) Interference of a speB 5' untranslated region partialdeletion with mRNA degradation in Streptococcus pyogenes. Mol OralMicrobiol.32(5): 390-403.


IBA Lifesciences(德國):IBA公司總部位于德國。二十年來,IBA以杰出的專利技術Strep-tag?系統為基礎,發展出完整的產品組合,涵蓋重組蛋白表達丶純化與固定以及從全血或相關體液中分離特定細胞的技術。同時,IBA也是全球領先的核酸合成專家,在DNARNA寡核苷酸的合成上已有超過二十年的經驗,能根據客戶的選擇,生產含有特定染料或化學修飾的特殊寡核苷酸。



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